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技術(shù)文章

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如何對可見分光光度計進行校準(zhǔn)工作

  • 更新時間2025-04-09
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  可見分光光度計是一種常用的分析儀器,用于測量樣品在可見光區(qū)的吸光度。為了保證其測量的準(zhǔn)確性和可靠性,定期校準(zhǔn)是至關(guān)重要的。以下是對可見分光光度計校準(zhǔn)過程的詳細(xì)描述:
  一、校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備
  1. 環(huán)境條件檢查
  - 需確保校準(zhǔn)環(huán)境穩(wěn)定。溫度應(yīng)控制在儀器規(guī)定的范圍內(nèi),通常為 15℃ - 35℃,避免溫度波動過大影響儀器性能。濕度一般要求在 40% - 80%,防止高濕度導(dǎo)致電子元件受潮或出現(xiàn)凝露現(xiàn)象。同時,要將儀器放置在平穩(wěn)的工作臺上,避免振動干擾。
  2. 儀器外觀與清潔檢查
  - 仔細(xì)檢查儀器外觀,查看是否有損壞、劃痕或松動的部件。特別要注意比色皿架、波長調(diào)節(jié)旋鈕等部位的完整性。
  - 對儀器進行清潔,用干凈的軟布擦拭外殼,去除灰塵和污漬。對于光學(xué)部件,如光源燈罩、比色皿架等,要用專門的光學(xué)清潔工具輕輕擦拭,防止劃傷光學(xué)表面。
  二、波長準(zhǔn)確性校準(zhǔn)
  1. 選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
  - 常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有鈥濾光片、鐠釹濾光片等。這些濾光片具有特定的吸收波長,可用于準(zhǔn)確校準(zhǔn)儀器波長。例如,鈥濾光片在 279.0nm、287.0nm 等波長處有特征吸收峰。
  2. 校準(zhǔn)操作步驟
  - 將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如鈥濾光片)正確安裝在比色皿架上,注意安裝方向要正確,確保濾光片表面與光路垂直。打開儀器電源,讓儀器預(yù)熱一段時間,一般為 15 - 30 分鐘,使儀器達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。
  - 通過儀器的操作界面設(shè)置掃描波長范圍,使其包含標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征吸收波長。然后啟動掃描程序,儀器開始測量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同波長下的吸光度。
  - 掃描完成后,觀察測量得到的吸光度峰值對應(yīng)的波長是否與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征波長相符。如果有偏差,按照儀器的操作手冊進行調(diào)整。調(diào)整方法可能因儀器型號而異,一般是通過調(diào)節(jié)波長調(diào)節(jié)旋鈕或在軟件界面輸入校準(zhǔn)系數(shù)來進行。
  三、吸光度準(zhǔn)確性校準(zhǔn)
  1. 使用標(biāo)準(zhǔn)溶液
  - 采用已知濃度和吸光度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,如一定濃度的重鉻酸鉀溶液。將標(biāo)準(zhǔn)溶液倒入比色皿中,約 3/4 高度即可。用擦鏡紙擦拭比色皿外壁,避免指紋和污漬影響測量。
  2. 吸光度測量與校準(zhǔn)
  - 將裝有標(biāo)準(zhǔn)溶液的比色皿放入比色皿架,正確定位。在儀器操作界面上設(shè)置測量波長,該波長應(yīng)是標(biāo)準(zhǔn)溶液有明確吸光度值的波長。
  - 進行吸光度測量,讀取測量值并與標(biāo)準(zhǔn)溶液的理論吸光度值進行比較。如果存在差異,通過儀器的校準(zhǔn)功能進行調(diào)整。調(diào)整方法可能是對滿度吸光度進行重新設(shè)定,或者根據(jù)儀器提示輸入校準(zhǔn)因子。

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